1、 在96孔板中配制100μl 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。
2、向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
4、向每孔加入 10μl CCK8 溶液（Engreen） (注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数)。
5、将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
6、用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
7、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μl 0.1 M HCl溶液或者1%w/vSDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。